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凱氏定氮儀應用及原理

更新時間:2018-06-27      點擊次數:1441

注意

1.每次使用儀器前,應讓儀器空煮一次,清洗儀器的內部管路。

2.儀器使用完畢,應將其中一只桶的桶蓋打開,將桶內的氣體排出,延長附件的使用壽命(3個或2個桶串聯,排氣時只打開一只桶蓋即可)。

凱氏定氮儀是根據蛋白質中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量的儀器。因其蛋白質含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法,故被稱為凱氏定氮儀,又名定氮儀、蛋白質測定儀、粗蛋白測定儀。

凱氏定氮儀原理

將有機化合物與硫酸共熱使其中的氮轉化為硫酸銨。在這一步中,經常會向混合物中加入硫酸鉀來提高中間產物的沸點。樣本的分析過程的終點很好判斷,因為這時混合物會變得無色且透明(開始時很暗)

在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉,然后蒸餾。這一步會將銨鹽轉化成氨。而總氨量(由樣本的含氮量直接決定)會由反滴定法確定:冷凝管的末端會浸在硼酸溶液中。氨會和酸反應,而過量的酸則會在甲基橙的指示下用碳酸鈉滴定。滴定所得的結果乘以特定的轉換因子就可以得到結果。

凱氏定氮儀儀器用凱氏方法檢測谷物、食品、飼料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化學品中的氨、蛋白質氮含量、酚、揮發性脂肪酸、二氧化硫、乙醇等含量。具有相當好的性價比,僅僅滴定過程需要人工操作一下,非常適合實驗室及檢驗機構常規檢測。廣泛用于食品、農作物、種子、土壤、肥料等樣品的含氮量或蛋白質含量分析。凱氏定氮儀

凱氏定氮儀原理:
蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量。
  1.有機物中的胺根在強熱和CuSO4,濃H2SO4 作用下,硝化生成(NH42SO4
  反應式為: 
  2NH2+H2S04+2H(NH4)2S04 (其中CuSO4做催化劑)
  2.在凱氏定氮器中與堿作用,通過蒸餾釋放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中
  反應式為: 
  (NH4)2SO4+2NaOH2NH3+2H2O+Na2SO4
  2NH3+4H3BO3(NH4)2B4O7+5H2O
  3. 用已知濃度的H2SO4(或HCI)標準溶液滴定,根據HCI消耗的量計算出氮的含量,然后乘以相應的換算因子,既得蛋白質的含量
  反應式為: 
  (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O
2NH4Cl+4H3BO3

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